LysoView Red 是一种溶酶体荧光探针，是荧光素 pH 指示探针，可以用来区分酸性细胞器，实现对溶酶体的特异性标记，从而将动态研究活细胞内溶酶体生物合成和功能成为可能。

      LysoView在酸性细胞器内富集，可导致其质子化，而质子化可以减轻染料分子侧链上的弱碱性，以减少荧光淬灭，使产生的荧光信号强度增大。因此，LysoView表现出 pH 依赖性，在酸性条件下，荧光信号强度增加。

      LysoView Red 可以单独或组合使用，检测酸化的溶酶体和细胞内溶酶体的功能改变。例如，某些肿瘤细胞的溶酶体具有较低的 pH 值，而有些肿瘤细胞则相反。此外，一些细胞的细胞器酸化缺陷表现为囊性纤维化和其他病症。LysoView荧光探针在此类应用上具有非常广泛的意义。

产品参数

      激发/发射波长：577/590nm

      运输条件：4℃运输

      储存条件：20℃，避光

      分子式：C20H24BF2N5O

      分子量：399.25

实验步骤

      ①打开产品包装前，请先将产品预热至室温，将装有产品的小管短暂离心，使融有染料的 DMSO 溶液沉积于管底。最佳工作浓度取决于不同的实验需求，本实验操作步骤说明仅提供一些初始条件作为参考。具体的染色浓度需要根据细胞类型、产品对细胞和组织的通透性等因素作相应调整。

      ②用培养基或 PBS 原液稀释，建议终浓度至少为 1µM。为了降低由染色液过量导致的假阳性，应该尽量使用较低的工作浓度。

      ③如果细胞染色后用不含染色液的培养基孵育，会出现荧光信号衰减和细胞起泡的现象。

      贴壁细胞：在干净的培养皿内用盖玻片让细胞爬片至合适的细胞密度，弃去培养液，加入适量预热至 37°C 的染色液，根据不同类型的细胞在合适的条件下孵育30 分钟~2 小时。弃去染色液，加入新鲜的培养基，使用荧光显微镜选择合适的滤光片镜检染色结果。如果细胞染色不充分，建议提高染色液的浓度或者延迟孵育的时间。

      悬浮细胞：离心细胞，弃去上清液；缓慢加入预热至 37℃的染色液，根据细胞类型选择合适条件让细胞与染色液孵育 30 分钟~2 小时；离心细胞，用预热的新鲜培养基重悬细胞；用荧光显微镜选择合适的滤光片镜检染色结果。如果细胞染色不充分，建议提高染色液的浓度或者延迟孵育的时间。

案例分析

注意事项

      1. 如果染色效果欠佳，可以提高染色工作液中探针的浓度，或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。

      2. 为了降低染色背景，尽可能的使用较低浓度的染料。

      3. 注意拍照要迅速，因为染料随着拍照时间的增加易淬灭。