叠氮溴化乙锭（Ethidium monoazide bromide，EMA）是Hixon等发现于上世纪70年代的核酸荧光染料，分子式为C21H18BrN5，分子量为420，不溶于水、可溶于乙醇的橙色固体。

产品特点

      当样品中死细胞活细胞共同存在时，EMA能选择性地与死细胞DNA共价结合。

主要原理

      通常死细胞的细胞膜已经遭到破坏，EMA很容易渗透到细胞内部从而插入到细胞内DNA双螺旋上。但活菌的细胞膜比较完整，EMA不能渗透到活菌内部。后续经过高强度的可见光曝光处理后，插入到DNA双螺旋上的EMA能够与DNA双螺旋发生共价交叉偶合，且这种共价偶合具有不可逆性，从而抑制后续PCR扩增中引物与死菌DNA的结合，达到区分死活菌的目的。

      EMA的荧光较弱，但与DNA结合后强度增加约15倍，激发/发射最大值约为504/600纳米。

案例分析

      以EMA-PCR为例说明：将EMA加入到含有活菌和死菌的测试样品中，曝光1min导致游离EMA穿透死亡细胞并与DNA共价结合，但不能进入活细胞。与EMA共价结合的死细胞DNA和未与EMA结合的活细胞DNA，在PCR反应中，来自活细胞的DNA是可以与引物结合进行PCR扩增，而死细胞DNA由于与EMA的不可逆结合不能被扩增。