产地:ABC
货号:ABC1821
规格:1ml
备注:常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率
聚凝胺(Polybrene)也称Hexadimethrine Bromide (海美溴铵),是一类多聚阳离子聚合物,溶解后带正电,可与细胞表面阴离子结合,常用于慢病毒、腺病毒等病毒介导的哺乳动物细胞感染,可显著提高慢病毒、腺病毒对某些细胞的感染效率。其作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。聚凝胺也是一种有名的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外聚凝胺也多用于蛋白测序,因为小剂量的聚凝胺在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入聚凝胺还能提高膜的亲和性。本产品主要成分浓度为10 mg/mL,经微孔滤膜过滤除菌。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输;4℃保存,12个月有效;-20℃保存,24个月有效。
操作步骤
1. 根据实验需求,提前将细胞种植于孔板中,于培养箱中培养过夜;
2. 参考相关文献或预实验所得MOI值,用完全培养基稀释病毒原液到所需浓度,并添加聚凝胺(10 mg/mL),使聚凝胺最终浓度在2-12 μg/mL(聚凝胺最常用浓度为5-8 μg/mL);
3. 吸除原有的培养基,将病毒液-培养基-聚凝胺混合液加入到孔板中,轻轻摇匀后,于培养箱中孵育;
4. 孵育6-16 h后,吸除含病毒的培养基,更换为正常的培养基,于培养中继续培养(病毒孵育的时间根据具体情况而定,如细胞状态良好,可适当延长孵育时间;反之,则需要提前更换为正常培养基);
5. 根据实验目的,培养一定时间后,对细胞进行收集或检测。
注意事项
1. 不同细胞对聚凝胺的敏感性不同,初次实验,建议先做细胞毒性检测。
2. 如-20°存放,建议适当分装,避免反复冻融。
3. 为了您的健康和安全,操作时请穿好实验服、戴好手套。
4. 不同的细胞耐受性、敏感性不一样,转染孵育时间长短,以及PEI/DNA使用比例,可视情况酌情调整。
5. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
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