胎牛血清使用指南

信息来源于:互联网 发布于:2023-03-25

胎牛血清是从胎牛脐静脉或心脏采集的血液经离心、过滤、灭菌等处理后得到的一种液态制品。胎牛血清通常分为胎儿血清和新生牛犊血清两种,其中胎儿血清是指从胎牛脐静脉采集的血液,而新生牛犊血清则是指从出生后7天内采集的血液。本文将对胎牛血清的用途、主要成分、功能、制作方法、储存方式、溶解方式、使用注意事项等进行详细全面的阐述。

一、用途

胎牛血清是一种重要的细胞培养基添加剂,可以提供细胞生长所需的营养物质、生长因子和激素等,促进细胞增殖和分化。此外,胎牛血清还广泛应用于疫苗制备、生物制品生产、药物筛选等领域。

二、主要成分

胎牛血清主要由水、蛋白质、脂质、糖类、无机盐和生长因子等组成。其中,蛋白质是胎牛血清的主要成分,占总质量的60%~80%。此外,胎牛血清中还含有多种生长因子,如胰岛素样生长因子、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子等,这些生长因子对细胞生长和分化具有重要的作用。

三、功能

胎牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。

1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

2.增加细胞对病毒和细菌的抵抗力,促进细胞代谢和免疫功能的提高。

3.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

6.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

7.起酸碱度缓冲液作用。

四、制作方法

胎牛血清的制作方法通常包括采集、处理、检测和包装等步骤。具体步骤如下:

1. 采集:胎牛心脏穿刺取血

2. 处理:预过滤血清、精过滤血清,三次0.1um过滤,避免病原微生物的污染

3. 检测:进行多项的质量控制检测,以及全面的理化、微生物检测,同时进行特定的细胞生长以及病毒检测。

4. 包装:将检测后的胎牛血清进行分装和包装,以便于存储和使用。

五、储存方式

建议胎牛血清到货后,先检查血清有无异常后及时放进冰箱,在-18~-20℃条件下进行储存。血清不宜4℃甚至更高温度长期保存,切忌反复冻融,少量使用时建议分装冻存。(整个操作需在无菌操作台中进行,注意无菌操作。)血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须预留一定体积,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。

六、溶解方式

建议使用血清梯度融化方法,以500ml装血清为例:

第一步:将血清从-20℃冰箱中取出后放置在室温90min或者15℃水浴18min

第二步:将血清放置在20℃水浴中融化25min

第三步:将血清放置在37℃水浴中融化35min

此类融化方法可以保证血清中各类因子的活性并且极大减少沉淀的产生。

七、使用注意事项

1. 胎牛血清应存放在低温环境中,避免受到阳光直射和高温的影响。

2. 在使用前,应先将胎牛血清缓慢解冻,并在4℃下保存,避免多次冻融。

3. 在使用胎牛血清时,应注意其批次和来源,以保证其质量和稳定性。

4. 在使用胎牛血清时,应注意其浓度和添加量,以避免对细胞生长和分化产生不良影响。

5. 在使用胎牛血清时,应注意其可能存在的病毒和细菌等污染物,以避免对细胞培养和生产产生不良影响。

综上所述,胎牛血清是一种重要的细胞培养基添加剂,具有促进细胞增殖和分化、提高免疫功能等多种功能。在使用胎牛血清时,应注意其储存方式、溶解方式和使用注意事项,以保证其质量和稳定性。