本产品是一种灵敏度较高的化学发光试剂盒，基本原理是以luminol为基础的化学发光；可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase, HRP）发生反应而发光，通过X-光胶片曝光或其他成像方法（如荧光或化学发光成像仪）进行检测；检测极限为纳克级，可满足大部分目的蛋白的曝光实验需求。

保存条件

      冰袋（wet ice）运输；2-8℃避光保存，有效期12个月。

操作步骤

      1. 将ECL A液和ECL B液等体积混合制成ECL工作液，室温配制，现配现用；

      2. Western Blot实验中PVDF膜（或NC膜）经二抗孵育后，多次洗涤，滤纸吸去多余液体；将膜放在两片洁净保鲜膜（或PE手套）中间，加入ECL工作液覆盖膜表面，此过程应小心完成，避免膜与膜之间产生气泡；

      3. 充分反应之后，用滤纸或吸水纸吸去多余的ECL工作液，随后进行压片检测或是荧光成像仪检测；

      4. 压完的胶片用显影、定影试剂（推荐ABC2037，ABC2041，ABC2042）进行显影和定影（若为荧光成像仪曝光忽略此步骤）；根据发光强度调整曝光条件；

注意事项

      1. ECL A液和B液吸液过程中务必更换枪头，避免A液、B液交叉污染，致使活性成分失效。

      2. 在与膜发生接触过程中，请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材，避免外源蛋白质及金属离子污染。

      3. 叠氮化钠会抑制HRP的活性，所有相关试剂应避免使用。

      4. ECL工作液配置完成后请于一天内使用完，请勿留置到第二天，以免影响实验结果的准确性。

      5. 各溶液使用后，请盖紧瓶盖避光保存，以防失效；特别是B液，含有氧化剂，容易被还原而失效。

      6. ECL化学发光试剂盒选择参照附表一，一抗及二抗推荐稀释比测试数据均来自自研抗体。

      7. ECL化学发光检测常见问题及解决方案参照附表二。

      8. ECL化学发光试剂盒A/B液均对人体有害，操作时务必小心，注意有效防护，避免直接接触人体或吸入呼吸道。

      9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附表一：ECL化学发光试剂盒选择参照表

附表二：ECL化学发光检测常见问题及解决方案