SDS-PAGE 凝胶快速制备试剂盒50T (ABC2055)
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价格:190.0

产地:ABC

货号:ABC2055

规格:50T

备注:1、可做任意浓度 2、可单独补充上层胶指示染料

产品简介

      本产品SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒,包含凝胶制备所需的所有试剂,用户只需准备少量纯水及制胶设备(制胶底座、玻璃板、梳子等),根据说明书操作即可在短时间内制得所需凝胶。本试剂盒可制备常规大小凝胶至少50块。

储存与运输

      冰袋(wet ice)运输;改良型促凝剂-20℃保存,其他2-8℃避光保存,有效期12个月。

使用方法

      1. 根据目的蛋白分子量和所选电泳缓冲液不同,选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶,参照表格如下:

SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围(kDa)
(Tris-Glycine电泳缓冲液,ABC2036)
最佳分离范围(kDa)
(SWE快速高分辨电泳缓冲液,ABC2099)
6% 50-300 15-300
8% 30-130 10-250
10% 20-100 5-150
12% 10-60 3-100
15% <40 <60

      2. 根据目标蛋白分子量大小,选取分离胶的浓度,以常用规格8.3 cm×7.3 cm凝胶板(单块)为例,可参考下表配制制胶液:

分离胶浓度 6% 8% 10% 12% 15%
玻璃板厚度(mm) 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5
所需制胶液总体积(mL)* 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0
H2O(mL) 2.16 3.24 4.32 1.89 2.84 3.78 1.63 2.44 3.25 1.36 2.04 2.72 0.96 1.44 1.92
30%丙烯酰胺(29:1)(mL) 0.8 1.2 1.6 1.07 1.6 2.14 1.33 2.0 2.67 1.6 2.4 3.2 2.0 3.0 4.0
4×Tris-SDS分离胶缓冲液(mL) 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0
改良型促凝剂(µL) 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80
TEMED(µL) 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0

*制胶液总体积不包含TEMED的体积。

      3. 浓缩胶配制可参考下表:

浓缩胶浓度(%) 5%
H2O/mL 1.75 2.63 3.5 5.25
30%丙烯酰胺(29:1)/mL 0.5 0.75 1.0 1.5
4×Tris-SDS浓缩胶缓冲液/mL 0.75 1.13 1.5 2.25
改良型促凝剂/μL 18 27 36 54
TEMED/μL 4.0 6.0 8.0 12.0
总体积*/mL 3.0 4.5 6.0 9.0

*总体积不包含TEMED的体积。

      4. 推荐电泳条件:

            a. 使用SWE快速高分辨电泳缓冲液(ABC2099)进行电泳:200-250 V恒压,25-35 min可完成电泳;

            b. 使用Tris-Glycine电泳缓冲液(ABC2036)进行电泳:设置电压上层胶90 V,电泳约30 min(marker进入分离胶);下层胶调整电压为150-180 V,约60-90 min(可根据实际情况调整)。

注意事项

      1. 所有试剂使用前需要提前复温至室温后方可使用。

      2. 改良型促凝剂相较于过硫酸铵(AP)稳定性更好,使用时拿出一支,使用结束后于4℃保存,以便后续常规使用,可保存六个月;若长期不用请放置于-20℃保存,避免反复冻融。

      3. 小于10 kDa的蛋白分离建议使用Tricine胶,丙烯酰胺凝胶可能不足以分离。

      4. 温度对于胶的凝固时间影响较大,为保证实验顺利进行,一般温度越低,凝固时间越长,可适当增加改良型促凝剂用量;温度越高凝胶越快,可适当减少改良型促凝剂用量。

      5. 凝胶需要充分的凝固时间,建议胶制好充分静置确保凝胶彻底。

      6. 当温度较低时,10%SDS溶液有结晶析出,于37℃复温融化后可继续使用。

      7. 如需快速制胶试剂,可购买本公司其他产品,如SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒(ABC2055),或超快速彩色凝胶配制试剂盒系列(ABC2059/ABC2060/ABC2061/ABC2062/ABC2063,ABC2078/ABC2079/ABC2080/ABC2081/ABC2082),及高分辨超快速彩色凝胶配制试剂盒系列(ABC2084/ABC2085/ABC2086,ABC2089/ABC2090/ABC2091),可满足不同实验需求

      8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

(产品包装升级中,以实物为准。)