油红O又名苏丹红5B，是一种脂溶性偶氮染料。该染料能特异性使细胞或组织内的甘油三脂等中性脂质着色，对于磷脂和类固醇等染色较弱，基本原理是油红O溶于脂质中使脂质呈现红色至橘红色。

      本产品饱和油红O染液，是油红O的饱和溶液，使用前经蒸馏水稀释后，可用于组织切片或细胞的染色，染色后组织内的脂滴呈红色至橘红色。

储存与运输

      常温避光保存与运输，有效期12个月。

使用方法

      l 配制工作液：临用前，6份饱和油红O染液与4份蒸馏水充分混合均匀，4℃静置过夜，第二天后用定性滤纸过滤一次，在4℃放置24h再过滤第二次，得到油红O工作液。另外，需自备60%异丙醇。

      l 样本准备

      1. 对于细胞：吸弃细胞培养液，向孔板边缘缓慢加入PBS（推荐ABC4220）简单清洗细胞。加入4%多聚甲醛固定液（推荐ABC1119）室温固定8-10 min，PBS漂洗2次。

      2. 对于冰冻切片：切片从-20℃取出后室温静置5-10 min恢复至常温。

      l 染色步骤

      1. 对于细胞

      （1）向孔板内加入少量60%异丙醇覆盖细胞15-20 s，吸弃60%异丙醇，稍微晾干水分。

      （2）向孔板内加入油红O工作液覆盖细胞，室温避光染色30 min，去除染色液。

      （3）加入60%异丙醇快速分化3-5 s，纯水洗3次，每次5 min。

      （4）（可选）加入苏木素染液（推荐ABC1022）对细胞核进行染色，水洗，返蓝再水洗。

      （5）加入PBS覆盖细胞后显微镜观察。如果是细胞爬片，可用甘油明胶封片剂（推荐ABC1420）封片。

      2. 对于冰冻切片

      (1) 恢复至室温的冰冻切片轻轻浸入油红O工作液浸染8-10 min（加盖避光）。

      (2) 取出切片，停留3 s后依次浸入两缸60%异丙醇分化3-5 s。

      (3) 切片依次浸入两缸纯水中浸洗，每次10 s。

      (4) （可选）切片浸入苏木素染液对细胞核进行染色，水洗，返蓝再水洗，稍微晾干水分后滴加甘油明胶封片剂封片。

注意事项

      1. 如果是新鲜组织冰冻切片，需要对切片先固定后再染色。

      2. 整个操作过程中注意动作轻缓，以免脂肪丢失或者移位。

      3. 油红O染色后的样本不能长期保存，应尽快观察及拍照。

      4. 用甘油明胶封片剂封片时需注意，尽量避免产生气泡，如果封片后有气泡不能按压玻片或强行撕扯盖玻片，否则会造成脂肪移位。可将玻片浸入50-60℃温水中，让盖玻片自行脱落，然后重新封片。

      5. 本产品大约可用于80张切片的染色。当组织或细胞着色明显偏浅或颜色异常时请更换新的染液。

      6. 为了您的安全和健康，操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。