产地:ABC
货号:ABC3619
规格:100T
备注:1.兼容性强,既可用作DNA产物直接纯化,又可用作DNA凝胶回收.2.整个操作过程无需离心,仅30min可回收80%以上的100bp-10kb的DNA片段
本试剂盒利用磁珠可逆的结合核酸的特性以及特有的缓冲体系,可快速、高效的纯化PCR产物和酶切产物,还可从琼脂糖凝胶中分离高纯度的特定DNA片段。整个操作过程无需离心,仅30 min可回收80%以上的100 bp-10 kb的DNA片段。纯化后的DNA片段可应用于酶切反应、连接反应、PCR扩增、测序等分子生物学实验。
储存与运输
常温运输,常温储存;有效期12个月。
使用前准备
1. 使用前请向Buffer SPW中加入指定量(见瓶身)的无水乙醇。
2. 自备磁力架和1.5 mL灭菌的离心管。
实验步骤
一、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段
1. 从琼脂糖凝胶中切下含有特异的DNA条带的凝胶块,尽量除去多余部分(切胶时不要将胶块长时间暴露于紫外灯下,防止DNA损伤)。将切下的凝胶块放入1.5 mL灭菌的离心管中(尽量捣碎胶块,有助于加快溶解),称取重量;
2. 向离心管中加入一定量的Buffer SPS(例如切下的凝胶块重量为0.1 g,则加入100 µL的Buffer SPS),60℃加热5-10 min,期间不断地上下颠倒离心管,直至胶块完全溶解;
3. 向上一步所得的溶液中加入等体积的无水乙醇,使用移液器或涡旋仪混匀,再加入0.6倍PCR体积或酶切体积的SweMag Beads(SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀),使用移液器或涡旋仪混匀;
4. 室温放置5 min,期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次,至磁珠分散均匀;
5. 将离心管移至磁力架上静置30 s,直至磁珠完全吸附,将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,勿将磁珠吸出);
6. 加入300 μL Buffer SPW,移开磁力架,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀;将离心管移至磁力架上静置30 s,再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,请务必吸尽离心管内残留的液体);
7. 重复操作步骤6;
8. 将离心管盖打开,室温放置5–10 min或65℃放置3–5 min,使乙醇完全挥发(避免磁珠过度干燥,以免影响核酸得率);
9. 移去磁力架,加入30–50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀,室温静置3 min;
10. 将离心管置于磁力架上,直至磁珠完全吸附,吸取上清至一新的离心管中,即得高纯度的DNA。
二、从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA
1. 向PCR反应体系或酶切反应体系中加入2倍体积的Buffer SPS和无水乙醇,使用移液器或涡旋仪混匀,再加入0.6倍PCR反应体积或酶切反应体积的SweMag Beads(SweMag Beads使用前需涡旋至分散均匀),使用移液器或涡旋仪混匀;
2. 室温放置5 min,期间使用移液器或涡旋仪混匀2-3次,至磁珠分散均匀;
3. 将离心管移至磁力架上静置30 s,直至磁珠完全吸附,将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,勿将磁珠吸出);
4. 加入300 μL Buffer SPW,移开磁力架,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀;将离心管移至磁力架上静置30 s,再将离心管随磁力架温和地上下颠倒数次,使管壁残留的磁珠和盐分冲刷下来,待上清清澈后,吸弃上清(为避免影响提取效率,请务必吸尽离心管内残留的液体);
5. 重复操作步骤4;
6. 将离心管盖打开,室温放置5–10 min或65℃放置3–5 min,使乙醇完全挥发(避免磁珠过度干燥,以免影响核酸得率);
7. 移去磁力架,加入30–50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water,用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀,室温静置3 min;
8. 将离心管置于磁力架上,直至磁珠完全吸附,吸取上清至一新的离心管中,即得高纯度的DNA。
注意事项
1. 操作之前,请务必认真阅读本产品说明书。
2. 磁珠悬液在保存过程中应避免冷冻。
3. 磁珠易沉淀,使用前应摇匀或涡旋混匀。
4. 加入磁珠前,需要将其他试剂混合均匀。
5. 洗脱DNA前应使乙醇完全挥发,避免残留的乙醇影响下游实验。
6. 请勿长时间干燥磁珠,以免影响DNA洗脱效率。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
(产品包装升级中,以实物为准。)
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