植物基因组DNA提取试剂盒 (ABC3652)
  • 植物基因组DNA提取试剂盒 (ABC3652)
价格:857.0

产地:ABC

货号:ABC3652

规格:50T

备注:1.可从植物组织提取纯化得到高纯度基因组DNA。2.应用广泛,可应用于多种植物的多种组织。3.简单快速,提取操作仅在1小时内完成

产品简介

      本试剂盒通过利用离心吸附柱技术和特有的的裂解缓冲体系,可安全、快速、高效的提取多种简单植物组织基因组DNA。植物样本经液氮完全研磨后与裂解液充分混合,能够快速释放基因组DNA,提取操作仅在1小时内完成。本试剂盒可从50-100 mg的植物组织中提取纯化得到1-10 µg的高纯度基因组DNA,提取的基因组DNA可用于PCR扩增、酶切反应、Southern杂交以及RAPD、AFLP、RFLP等多种常规分子生物学实验。

储存与运输

      RNase A冰袋(wet ice)运输,-20℃保存;其余试剂常温运输,常温储存;有效期12个月。

使用前须知(请仔细阅读)

1. 超低温冻存的植物样本避免反复冻融,否则会导致提取的DNA质量与产量下降。

2. Buffer PGL1如有沉淀出现,使用前请于65℃加热,直至沉淀消失,混匀即可使用。

3. 使用前请向Buffer PD和Buffer PW中加入指定量(见瓶身)的无水乙醇。

操作步骤

1. 植物组织样本裂解:

      a. (推荐)取新鲜或超低温冻存的植物组织50-100 mg,迅速转移到装有2-3颗3 mm的研磨珠(推荐ABC0221-150G)并用液氮预冷的2.0 mL RNase-Free研磨管(推荐ABC-200-M)中,将研磨管置于研磨仪(推荐ABC901001)上(放置研磨管前将适配器于液氮中迅速预冷)进行研磨,直至研磨成粉末状(如果没有完全研磨成粉末状,会影响DNA得量和质量)。然后加入400 μL Buffer PGL1和6 μL RNase A,使用移液器吹打至裂解液中无明显沉淀,室温静置10 min。

      b. 取新鲜或超低温冻存的植物组织50-100 mg,迅速转移到用液氮预冷的1.5 mL RNase-free离心管中,加入液氮,用研杵研磨组织,其间不断加入液氮,直至样本研磨成粉末状(如果样本没有完全研磨成粉末状,会影响DNA得量和质量)。然后加入400 μL Buffer PGL1和6 μL RNase A,使用移液器吹打至裂解液中无明显沉淀,室温静置10 min。

      c. 取新鲜或超低温冻存的植物组织50-100 mg,迅速转移到用液氮预冷的研钵中,加入液氮,用研杵研磨组织,其间不断加入液氮,直至研磨成粉末状(如果没有完全研磨成粉末状,会影响DNA得量和质量),将研磨成粉末状的样本加入到含有400 μL Buffer PGL1和6 μL RNase A的1.5 mL RNase-free离心管中,使用移液器吹打至裂解液中无明显沉淀,室温静置10 min。

2. 向离心管中加入130 μL Buffer PGL2,使用移液枪吹打混匀,冰上放置5 min;

3. 12,000 rpm离心5 min,将上清转移至一新的离心管中;

4. 向离心管中加入与上清液等体积的Buffer PD,上下颠倒混匀;

5. 将DNA Spin Column安置于Collection Tube上,并将上述混合液转移至DNA Spin Column中。每次加入量不超过600 µL,如果超过600 µL可分批加入;

6. 12,000 rpm离心30 s,弃掉滤液。将DNA Spin Column重新放回Collection Tube中;

7. 向DNA Spin Column中加入600 μL Buffer PW(请沿管壁加入Buffer PW,有助于冲洗管壁上残留的盐分)12,000 rpm离心30 s,弃掉废液;

8. 重复操作步骤7;

9. 将DNA Spin Column放入Collection Tube中,12,000 rpm离心2 min;

10. 将DNA Spin Column置于一新的1.5 mL的离心管中,室温放置3-5 min,使DNA Spin Column残留的乙醇完全挥发;

11. 向DNA Spin Column的膜中央加入50-100 μL Buffer TE或Nuclease-free Water,室温放置5 min(将Buffer TE或Nuclease-free Water加热至65℃有利于提高洗脱效率);

12. 12,000 rpm离心2 min,收集DNA。若要得到更高浓度的DNA,也可以将第一次的洗脱液重新加回至DNA Spin Column中,室温静置5 min,12,000 rpm离心2 min,再次收集DNA。

注意事项

1. 尽量使用新鲜植物组织,以确保基因组DNA的得率与完整性。

2. 提取的DNA若要长期保存,请用Buffer TE洗脱,并于-80℃保存。

3. 得到的基因组DNA避免多次反复冻融。

附表

本试剂盒对多种植物样本基因组DNA提取量见下表,基因组DNA的提取量和植物种类、部位以及生长状态有关,样本推荐用量如下表。

样品名称 样本用量 DNA得量
水稻叶片 50 mg 5-10 μg
油菜叶片 50 mg 4-8 μg
拟南芥叶片 80 mg 0.5-1 μg
烟草叶片 50 mg 2-4 μg
番茄叶片 50 mg 2-5 μg
韭菜叶片 50 mg 3-6 μg
芹菜叶片 50 mg 2-4 μg
绿萝 50 mg 0.5-1 μg
白杨 50 mg 1-2 μg
白菜 50 mg 1-2 μg

本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

(产品包装升级中,以实物为准。)

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